Guangzhou Changyu Biological Technology Company

06/09/2017

From 1st Sep to 31th Dec, our cDNA synthesis kit is in big sale, 50 reaction kits, Catalog Quotation: 138$; Sales Price: 86$. More information please refer to the Website: http://changyubio.com/product/277928092;

03/06/2016

由于植物品种的多样性造成很多植物RNA提取情况复杂多变,而且植物类的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分,造成RNA提取过程中极易发生氧化、褐化、降解等情况。手工的CTAB类的方法由于提取时间太长,太繁琐,不在本讨论范围之列。一直以来没有一款好的试剂盒包括一系列价格高昂的进口试剂盒也无法满足科研工作者对植物RNA提取的要求。

市面上最常见的RNA提取试剂盒无非是两种:第一种:TRIzol改良类方法(包括溶液型的和离心柱型的);第二种:直接裂解过柱子的方法(离心柱型)。

第一种试剂盒失败的原因:市面上最流行的RNA提取方法就是TRIzol,或者TRIzol改良,或者TRIzol加离心柱一类的改良方法。TRIzol也就是异硫氰酸胍/苯酚/氯仿原理一步法的方法最适合的对象是动物源性的组织细胞。另外,针对普通多糖多酚低的植物样品,TRIzol类原理产品也可以提取。但是多糖、多酚、次级代谢产物丰富的情况下,TRIzol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰,要么残留大量DNA,要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物,氧化破坏RNA,或者残留的这些多糖多酚、色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。

尽管市面上绝大多数的国产厂家是在TRIzol的方法基础上进行了改良,但是限于技术水平的限制,实践证明,无论是不是加了离心柱,基于TRIzol的改良不能从根本上解决问题。判断某试剂盒是否使用这种基于TRIzol进行改良的方法非常简单:裂解液是否含有苯酚的味道和是否使用氯仿,如果含有苯酚的味道或者使用了氯仿就是TRIzol方法的改良。

第二种试剂盒失败的原因:直接裂解过柱子的方法是目前最先进,但是也是技术含量最高的方法。这个方法采用裂解液(不含苯酚,氯仿)直接裂解,RNA/DNA同时过柱子,然后在柱子上面直接分离RNA/DNA,所以,这种方法的优点第一在于避免了使用trizol在多糖多酚下不能成功分离RNA/DNA的弊端;第二在于不使用有毒的苯酚氯仿。但是正是因为其技术先进,所以难度很高,国内厂家包括进口公司有两个技术难点一直没有突破。第一,裂解液的成分必须针对去除多糖多酚进行研发添加去多糖多酚,代谢产物的成分,否则同样会碰到多糖多酚干扰提取的问题。第二,和TRIzol原理不同,直接过柱法DNA/RNA同时加到吸附柱上去,如何去除DNA是又一个难点,否则会残留大量DNA。两个技术难点导致了国内/国外公司研发的第二种类型的试剂盒,要么残留大量DNA,要么裂解液里面没有去除多糖多酚成分,所以也常常不能成功提取较复杂植物RNA样品如黑加仑、冬青等植物样品。

针对多糖多酚植物的特点,和以上两种试剂盒提取失败的原因,广州常誉生物科技有限公司销售的改良型植物RNA EASYspin系列提取试剂盒(http://www.changyubio.com/categoryResultlist?EntityTypeName=product&categoryId=1152757),在多个方面处于世界领先水平:第一,采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIzol苯酚,氯仿原理方法,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚的成分,解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离问题。

第二,突破了直接过柱子的方法中的DNA残留的技术难点,解决了DNA残留过多问题。实验结果表明,几十种国内外试剂盒提取失败的例子,包括棉花苹果等常规试剂盒不易提取的样品,使用广州常誉生物科技有限公司销售的改良型植物RNA EASYspin系列提取试剂盒(http://www.changyubio.com/categoryResultlist?EntityTypeName=product&categoryId=1152757),20分钟即可轻松提取,且无苯酚氯仿,所提取的高质量的RNA可以成功完成下游反应试验。

第三,实践过程中我们发现,部分复杂植物或者DNA含量特别丰富的植物样品使用某进口试剂盒提取的RNA中会有明显的DNA残留。而广州常誉生物科技有限公司销售的EASYspin plus 植物RNA提取试剂盒(http://changyubio.com/product/277246279)及加强版植物RNA EASYspin plus(http://changyubio.com/product/277246276)能轻松解决DNA残留问题,该试剂盒使用基因组DNA清除柱子,配合独家研发的溶液,不需要DNA酶消化,操作简单仅需增加10秒钟清除基因组DNA残留的步骤,不用苯酚,氯仿,25-30分钟完成全部试验过程。我们测试的几种多糖多酚高难度植物样品所提取的植物RNA中均无DNA残留。

部分成功样品:
棉花、海棠、黑加仑、烟草、拟南芥、虎杖、大豆、草莓、冬青、月季、蔷薇、沙棘、冬枣、芦荟、仙人掌、报春花、水稻、玉米、唐菖蒲、樱桃、白玉兰、毛白杨、樱花、葡萄、百合花、紫菜、绿藻、香蕉、水仙花、青花菜、地被菊、苹果、梅花、番茄、石斛、毛桃、苎麻等等,其中的黑加仑、海棠等高难度提取样品均可用植物RNA EASYspin系列成功提取RNA。

请通过以下几种方式联系我们:A、微信公众号:常誉生物;B、百度贴吧:常誉生物吧;C、Email:[email protected];D、客服电话:400-6306163;索取广大科研单位包括北京林业大学,北京农学院,中国农业大学,中国科学院,中国农业科学院等科研单位利用广州常誉生物科技有限公司销售的改良型植物RNA EASYspin系列提取试剂盒(http://www.changyubio.com/categoryResultlist?EntityTypeName=product&categoryId=1152757)已经发表的大量文献。

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